气相色谱法测定草莓中9种有机磷农药残留方法研究

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　　摘要：本文研究了草莓中的有机磷农药(包括甲胺磷、乙酰甲胺磷、治螟磷、氧化乐果、马拉硫磷、治螟硫磷、对硫磷、丙溴磷、三唑磷)残留检测方法。方法：选用乙酸乙酯提取浓缩后经活性炭柱净化，DB-1701毛细管柱色谱分离，用气相色谱-FPD检测器测定。结果9种农药在18 min内获得良好的分离，在0.05-1.0 μg/mL的浓度范围线性良好，相关系数r为0.9982~0.9999，检测限可达0.002~0.08 mg/kg，当添加水平为0.5μg//mL时，本法回收率范围为87.6%~96.8%。该法快速准确灵敏，且易操作。

　　关键词：气相色谱法；草莓；有机磷农药残留

    中图分类号：G714    文献标识码：A    文章编号：1005-1422（2014）10-0135-02

    草莓有着“水果皇后”的美誉。营养价值高，富含维生素C、果糖、蔗糖、柠檬酸、苹果酸、水杨酸、氨基酸以及钙、磷、铁等矿物质。中医认为，草莓具有润肺生津、清热凉血、健脾解酒、补血益气等功效。近年来，草莓作为特种经济作物已成为我国一项重要经济发展项目。但同时由于草莓属草本植物，植株比较低矮、果实细嫩多汁，容易导致其受病虫害和微生物的侵袭。因此，种植草莓的过程中要经常使用农药。不法果农甚至为了增产增收，在采收期间，仍会喷洒甲胺磷等高毒农药。严重影响了果品的质量安全，因此食用草莓中毒事件时有发生。

　　近年来，加强农产品质量安全监管力度，完善其分析检测手段是保障民生的重要举措之一。为满足我国草莓进出口贸易的需要，方法检出限不仅要满足我国的农残限量标准要求，还要满足欧盟、美国等其他国家和地区的限量标准要求。本文采用乙酸乙酯提取，净化后DB-1701柱色谱分离，FPD检测器快速分析草莓中9种有机磷农药残留量，线性相关系数r在0.9982~0.9999，最低检测限可达0.002~0.008 mg/kg，完全满足国内外市场对草莓中有机磷农药残留检测要求。

　　一、实验部分

　　1.仪器与试剂

　　安捷伦7890型气相色谱仪，配有FPD检测器。T-25 basic匀浆机（IKA公司）；N-EVAP-24氮吹仪（美国Organomation）。

　　乙腈和二氯甲烷，色谱纯(Merk公司)；乙酸乙酯、丙酮和正己烷，分析纯（重蒸）；无水硫酸钠，700 ℃烘烤4 h；有机磷农药标准品购于农业部环境保护科研监测所：各浓度农药标准品均由丙酮稀释而成，并置于-18 ℃保存。

　　2.实验方法

   （1）样品的提取与净化

　　取适量草莓擦净，去掉不可食部分后捣碎，称取10.0 g混匀的试样，置于50 mL塑料管中，加入5 g无水硫酸钠，在混匀器上混匀1min，再加入20 mL乙酸乙酯，在混匀器上充分混匀2 min，以4000 r/min的速率离心4 min，取出上清液。残渣再用15 mL乙酸乙酯提取2次，合并3次提取液，于氮吹仪上40 ℃浓缩至1.0 mL，将浓缩过的提取液过活性炭小柱，再用5 mL正己烷:丙酮(2?1)的混合液淋洗2次，收集全部洗脱液，40 ℃氮吹浓缩至1.0 mL，供气相色谱分析。（活性炭小柱预处理：将其安装于固相萃取真空抽滤装置上，用5 mL乙酸乙酯预淋洗小柱3次。）

　　（2）色谱条件

　　DB-1701（30.0 m×320 μm×0.25 μm）；柱流量3.0 mL/min，气体流量：N2 60 mL/min，Air 100 mL/min，H2 75 mL/min；温度：进样口：250 ℃；检测器：250 ℃；柱温：80 ℃（0 min）；以20 ℃/min升至200 ℃（3 min）；以20 ℃/min升至230 ℃（5 min）；以40 ℃/min升至260 ℃（5 min）。进样量1 μL，外标法定量。

　　二、结果与讨论

　　1.净化方法的选择

　　由于草莓样品本身果肉多汁，鲜美红嫩，富含水分和色素。因此，在提取过程中，为了避免水分对溶剂提取的干扰和色素对色谱柱分离的影响，经比较，本文选取无水硫酸钠+活性炭柱净化，步骤少、干扰易去除，得到较好的分离效果。

　　2.洗脱剂的选择

　　本文分别用甲醇、乙腈、丙酮和正己烷四种试剂作洗脱剂。实验表明，用甲醇洗脱时，流出液有颜色，色素也被洗脱下来。而乙腈洗脱时，对待测物的洗脱能力不强，回收率低。用丙酮和正己烷混合溶剂洗脱时，既保留了色素在净化柱上，又完全洗脱了有机磷农药，达到去除干扰的目的。

　　3.色谱条件的选择

　　为了提高分析效率、缩短分析时间，并避免待测物的热分解，按色谱条件程序升温，结果表明，在18 min 内能有效地分离9种有机磷农药，分离效果及峰形均能满足方法要求，分离效果如图 1 所示。

图19种有机磷农药标准色谱图

注：1-甲胺磷；2-乙酰甲胺磷；3-治螟磷；4-氧化乐果；5-马拉硫磷；6-杀螟硫磷；7-对硫磷；8-丙溴磷；9-三唑磷

　　4.标准曲线、线性范围及检出限

　　准确配制5组含量分别为0.05、0.1、0.2、0.5和1 ppm的9种有机磷农药混合标准溶液，按选定的条件实验，以仪器的3倍噪声表示检出限。由表 1 可见，在该色谱条件下，9 种农药均有较宽的线性范围及较好的线性。
表1草莓中9种有机磷农药GC测定的标准曲线方程和相关系数( n=7)

项目
线性范围
检测限
   标准曲线
相关系数r
甲胺磷
0.05-1 ppm
0.002mg/kg
Y=10163.80x+4.68412
0.9999
乙酰甲胺磷
0.05-1 ppm
0.002mg/kg
Y=6424.264x+23.2639
0.9999
治螟磷
0.05-1 ppm
0.003mg/kg
Y=8838.593x+52.1131
0.9998
氧化乐果
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=4950.845x+37.3710
0.9996
马拉硫磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=3620.486x+25.5042
0.9997
杀螟硫磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=4241.315x+25.4452
0.9997
对硫磷
0.05-1 ppm
0.003mg/kg
Y=4508.999x+31.5967
0.9998
丙溴磷
0.05-1 ppm
0.008mg/kg
Y=3417.386x+123.983
0.9982
三唑磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=3847.973x+33.3934
0.9997

　　5. 加标回收试验

　　称取五份10 g草莓样品，准确加入0.5 μg/mL的混标1.0 mL，测得对照值，计算平均回收率（n=5）分别为：甲胺磷：96.8%（RSD=1.5%）、乙酰甲胺磷：94.3%（RSD=2.3%）、治螟磷：93.7%（RSD=1.9%）、氧化乐果：92.5%（RSD=2.4%）、马拉硫磷：90.1%（RSD=3.2%）、杀螟硫磷：89.4%（RSD=2.8%）、对硫磷：90.6%（RSD=2.6%）、丙溴磷：87.6%（RSD=3.0%）、三唑磷：92.1%（RSD=2.5%）。

　　三、结论

　　采用气相色谱－火焰光度检测器( FPD)同时检测草莓中 9种有机磷农药，方法快速、简便，获得了满意的分离效果和较高的灵敏度，完全能够满足食品中农药残留卫生标准的要求，适合于草莓中多种有机磷农药残留的同时测定。

    参考文献:

［1］ 谷日旭，王彩云，秦长睿. 毛细管气相色谱法测定食品中11种有机磷农药［J］.中国卫生检验杂志, 2003,13(4):447.

［2］ 郭虹，王宝旺，雷凯. 毛细管柱气相色谱法测定蔬菜中有机磷农药多残留［J］.现代预防医学，2008,35（23）：4658-4660.

［3］ 林国斌，赵道辉，陈宏靖. 气相色谱法毛细管柱同时测定蔬菜中七种有机磷农药含量［J］.实用预防医学, 2002,9(1):91.

［4］ 中华人民共和国卫生部. GB2763—2005 食品中农药最大残留限量［S］ . 北京: 中国标准出版社, 2005.